電気泳動解析法

　DNAやタンパク質などの分子が電場中を移動する現象を応用した解析手法です。

　ＤＮＡの電気泳動は、酸である核酸が水溶液中でマイナスに帯電します。溶液中に電気を流すとプラス方向へ流れていきます。DNAを流すアガロースゲルなどは、肉眼では見えない程細い網目構造となっていて、より小さな断片程網目構造を素早く移動できるので、大きさによって分離できます。

　○　サザンブロット法

特定の塩基配列をもつDNAを検出する方法です。試料中のある特定のDNA断片があるかどうか調べたいとき、ゲル電気泳動を使えば大きさ(長さ)は分かりますが、大きさだけでは本当に調べたいDNAであるかどうかわかりません。同じ大きさの違うDNAかもしれません。そこでゲル内のDNAを一本鎖に解離させ、メンブレンに転写して熱などにより固定します。そこに目的のDNAに特異的な配列に相補的な一本鎖DNAやRNA（これらをプローブと呼んでいます）を反応させます。プローブは特定の塩基配列にしか結合しないため、目的のDNA断片のみが検出されます。開発者のエドウイン・サザン（Edwin Southern）に由来して、サザンブロット法と呼ばれています。同様の原理でRNAの検出を行うのがノーザンブロット法、タンパク質の検出を行うのがウエスタンブロット法です。

　○　ノーザンブロット法

RNAの混合試料から特定の塩基配列を持つ分子を検出する方法です。原理的にはサザンブロット法と同じで標識したDNAを用いて検出します。この方法により試料の細胞に目的のｍRNAが発現しているかどうかを調べることができます。

　○　ウエスタンブロッティング

複数種のタンパク質の混合試料から特定のタンパク質を検出する方法です。試料をポリアクリルアミド電気泳動などで分画します。泳動後、ニトロセルロース膜などに移します。標識した二次抗体を用いて、間接的に目的タンパク質を検出する方法です。

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