一過性トランスフェクション

　一過性トランスフェクションでは、導入された核酸は限られた期間だけ細胞内に存在し、ゲノムには組み込まれません。このように一過的に導入された遺伝物質は細胞分裂を介して世代から世代へと受け継がれることはなく、環境因子によって失われるか、細胞分裂を通して希釈されます。しかしながら、高コピー数で導入される遺伝物質は、その期間、高レベルの発現タンパク質を細胞内に存在させることにつながります。

使用するコンストラクトによりますが、一過的に発現される導入遺伝子は一般的に1〜7日間にわたり検出され、一過的に導入された細胞は通常トランスフェクション後24〜96時間以内に回収されます。遺伝子産物を解析するためには、酵素活性アッセイや免疫アッセイに使用するためのRNAやタンパク質を分離することが必要です。最適な期間の間隔は、細胞の種類、研究目標、および導入された遺伝子特有の発現特性、ならびにレポーターが安定な状態に到達するまでの期間に依存します。しかしながら、大部分の外来DNAは2〜3日以内にヌクレアーゼによって分解されるか、細胞分裂によって希釈され、一週間後にはその存在は検出されなくなります。

一過性トランスフェクションは、スーパーコイルプラスミドが用いられる場合に、より効率的に細胞に取り込まれると想定され、最も効率的と考えられます。siRNA、miRNA、mRNAに加え、タンパク質でさえも、プラスミドDNAと同様に、一過性トランスフェクションに用いることが可能ですが、これらの高分子は高品質で比較的純粋であることが必要とされます。導入されたDNAは核に移行し、転写されるのに対し、導入されたRNAはサイトゾルに残り、転写後（mRNA）またはmRNAへの結合後、数分以内に発現され、ターゲット遺伝子（siRNAおよびmiRNA）の発現を抑制します。

＜出典：Wikipedia＞

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　⇒　トランスフェクション（transfection）