Subject : クローニングベクター(cloning vector)
カテゴリー : 学術情報 > 生化学
クローニングベクター(cloning vector)
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クローニングベクター(cloning vector)とは、生物に安定に保持され、クローニングのために外来DNA断片を挿入できる小さなDNAの断片である。クローニングベクターは、ウイルス、高等生物の細胞から採取したDNA、または細菌のプラスミドである可能性がある。ベクターは、制限部位の存在などにより、DNA断片のベクターへの挿入やベクターからの除去を簡便に行うことができる機能を有する。ベクターと外来DNAは、DNAを切断する制限酵素で処理することができ、こうして生成されたDNA断片は、スティッキーエンドとして知られる鈍端またはオーバーハングを含み、ベクターDNAと外来DNAは、適合する端を有する分子結紮によって結合することができる。DNA断片をクローニングベクターにクローニングした後、さらに別のベクターにサブクローニングして、より特異的に使用することもできる。
クローニングベクターには多くの種類がありますが、最も一般的に使用されるのは、遺伝子工学的に設計されたプラスミドです。クローニングは一般にまず大腸菌を用いて行われ、大腸菌のクローニングベクターにはプラスミド、バクテリオファージ(ファージλなど)、コスミド、細菌人工染色体(BAC)などがある。しかし、大腸菌で安定に維持できないDNA、例えば非常に大きなDNA断片もあり、酵母のような他の生物を使用することもある。酵母のクローニングベクターとしては、酵母人工染色体(YAC)などがある。
分子生物学で一般的に使用されるクローニングベクターは、適切なクローニングサイトや選択可能なマーカーなど、その機能に必要な主要な機能を備えています。また、その用途に応じた付加的な機能を持つものもある。簡単で便利という理由から、クローニングはしばしば大腸菌を使用して行われる。したがって、使用されるクローニングベクターは、機能的な複製起点(ori)のような、大腸菌での増殖および維持に必要な要素を有することが多い。ColE1複製起点は、多くのプラスミドに含まれている。また、ベクターの中には、大腸菌だけでなく他の生物でも維持できるような要素を含むものもあり、このようなベクターをシャトルベクターと呼んでいます。
<出典:Wikipedia>
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DNA(デオキシリボ核酸)
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