TALEN

　ZFNの次に開発された人工ヌクレアーゼは、2010年に米国のグループにより発表されたTALENです。ZFNと同様に制限酵素を元に作られます。TALENのDNA認識・結合部分「TALEタンパク質」は、一組で30〜40の塩基配列の認識が可能です。

TALEタンパク質はそれ以前にすでに作製法が確立されていたため、ZFNと比べると作製が容易です。そのため、発表されるとすぐにゲノム編集技術の主役となりました。しかしそれでも、作製にはかなりの労力が必要です。

＜出典：Wikipedia＞

TALEN（Transcription activator-like effector nuclease：転写活性因子様エフェクターヌクレアーゼ）は、細菌のTALEタンパク質とFokIヌクレアーゼからなる融合タンパク質です。
ZFNと同様に、TALENの特異性はタンパク質‐DNA間の特異的結合に由来します。TALENの場合、単一のTALEは1つのヌクレオチド（1塩基）を認識し、TALEアレイはより長い配列と結合することができます。各TALEの作用は、1ヌクレオチドのみに限定され、隣接するTALEの結合特異性に影響を及ぼさないため、TALENの構築はZFNと比較してはるかに容易です。ZFNと同様に、TALEモチーフは、FokIエンドヌクレアーゼと結合しており、DNAを切断する場合は二量体を形成する必要があります。つまり、標的DNA領域近傍の対向鎖に別のTALENが結合しなければなりません

TALENは、DNA認識・結合ドメインとしてTALEリピートを利用し、そのC末端にDNA切断ドメインのFok�Tを連結した人工制限酵素である。TALENは一組として働き、Fok�Tの部分が二量体を形成して、二本鎖DNA切断 (DSB) を誘導する。4番目と32番目のアミノ酸残基（赤色）はnon-RVDとよばれ、DNAとの強い結合に関わる。

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